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牲畜兽医学报 2009
山羊子宫内膜基质细胞永生化研究, PP. 818-823 Abstract: ?将真核表达质粒pcineohtert通过dna转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞(escs),筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及e2、p4等性腺激素的反应性测定。结果,传至2代的山羊escs经转染pcineohtert,g418筛选2~3周后,抗性克隆形成,滤纸片法转移,扩增并连续培养,共获得5个细胞克隆,扩大培养后的细胞呈典型的长梭形和三角形,相互平行排列成束,与原代培养形态一致。转染后细胞有较高的端粒酶活性,细胞增殖加速,传代时间缩短,传至50代仍稳定增殖。波形蛋白检测阳性,角蛋白检测阴性,具有转染前山羊子宫内膜基质细胞特性。雌激素(100nmol·l-1)和少量孕激素(10nmol·l-1)对转染后基质细胞增殖有促进作用。获得了永生化的escs,为子宫内膜细胞体外研究奠定了基础。
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