5匹马外周血单个核细胞表达mhc-i类分子的差异分析

？基于rt-pcr方法，扩增了用于马传染性贫血病毒（equineinfectiousanemiavirus,eiav）减毒疫苗株ctl表位研究的5匹马的编码经典mhc-i类分子的大部分基因，具体包括编码肽结合区大部分区域、α3区、穿膜区及胞浆区蛋白的基因，并进行了pcr产物的克隆和测序。试验马匹外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcells,pbmc)的总rna提取物经rt-pcr扩增，并将所得产物进行t-a克隆。从每匹马的所有克隆中，分别随机挑取鉴定为阳性重组质粒的21~23个克隆用于测序分析。研究结果表明，5匹试验马匹各自具有3~5个等位基因，由于mhc-i分子等位基因表达的共显性特征，可以推测马的基因组内可能存在2~3个基因座对应于这些等位基因，这与国外已有研究结论基本一致。另外，不同马匹pbmc表达的mhc-i类分子的差别水平不一致。除了6号与7号和10号马之间mhc-i类分子的差异较大，无相同或高度相近的经典mhc-i类分子序列外，各马匹间均表达具有1个或1个以上的相同或高度同源的对应经典的mhc-i类分子的mrna。以上研究结果既可作为正在开展的eiav减毒疫苗株ctl表位研究的基础性、支持性数据，又可进一步丰富国内马的经典mhc-i分子多态性方面的相关研究。