番鸭(cairinamoschata)睾丸n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶的提取及性质研究

？以番鸭睾丸为材料，通过硫酸铵沉淀分级分离、deae-32离子交换柱层析和sephadexg-100分子筛柱层析纯化，获得比活力为19.18u/mg、纯化倍数为6.46倍的n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖苷酶制剂。以对-硝基苯-n-乙酰-β-d-氨基葡萄糖为底物，研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明：酶的最适ph为5.6，该酶在ph3.0~7.6区域较稳定，而在ph>7.6能很快失活；酶的最适温度为55℃。当温度为80℃时，酶完全失活。在40℃以下处理30min，酶活力保持稳定，高于45℃，酶稳定性较差。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程，测得米氏常数km为0.215mmol/l，最大反应速度vm为5.54μmol/l·min。酶催化pnp-β-d-glcnac反应的活化能为69.05kj/mol。金属离子对酶的效应试验表明：高浓度的na+和k+对酶有抑制作用；mg2+对酶有轻度激活作用，cu2+、pb2+、zn2+、ca2+、ba2+对酶活力有不同程度的抑制作用；al3+对酶有抑制作用。