应用端粒酶逆转录酶基因使猪血管内皮细胞永生化的初步研究

？为寻求使猪主动脉血管内皮细胞增殖寿命延长的方法，本试验将含有的人类端粒酶催化亚基端粒酶逆转录酶(humantelomerasereversetranscriptase,htert)基因的真核表达质粒pci-neo-htert通过脂质体介导法导入猪主动脉血管内皮细胞(porcinearterialendothelialcell,paec)。对转染后的血管内皮细胞进行ⅷ因子和cd34鉴定，利用pcr-elisa方法检测htert导入后细胞端粒酶活性表达情况，探讨了转染后细胞的生长特性。结果显示，转染后的细胞ⅷ因子和cd34均呈阳性，证明转染后细胞仍表达血管内皮细胞的特异性蛋白；导入htert后,细胞有较高的端粒酶活性,增殖寿命较对照细胞延长了20代。表明htert导入细胞能重建细胞端粒酶活性,从而延长细胞在体外培养的寿命。