|
牲畜兽医学报 2007
鸡胚原始生殖细胞(pgcs)玻璃化冷冻的研究, PP. 301-306 Abstract: ?对发育至第19期和第28期鸡胚性腺原始生殖细胞(primordialgermcells,pgcs),用六种玻璃化冷冻液i:10%dmso+10%eg+10%pvp,ii:20%eg+10%pvp,iii:20%dmso+10%pvp,iv:10%dmso+10%eg+0.5mol/lsurcose,v:20%eg+0.5mol/lsurcose,vi:20%dmso+0.5mol/lsurcose进行冷冻保存。结果:第19期鸡胚pgcs玻璃化冷冻复苏后存活率,在冷冻液ii与iv之间差异不显著(p>0.05),v与vi之间差异显著(p<0.05),其余各冷冻液之间差异均极显著(p<0.01)。第28期鸡胚pgcs玻璃化冷冻复苏后存活率,在冷冻液iv与v之间差异显著(p<0.05),iii与iv、v之间差异不显著(p>0.05),ii与iii、iv之间差异不显著(p>0.05),其余各玻璃化冷冻液之间差异均极显著(p<0.01)。复苏后接种培养传至第2代的鸡胚pgcs细胞,pas染色、akp染色呈阳性并保持完整的二倍体核型。目的:克服慢速冷冻法保存pgcs过程中需长时间平衡和逐渐降温的缺点,建立快捷的玻璃化冷冻保存法,进而为禽类遗传资源多样性的保存提供另一途径,为pgcs体外操作提供细胞来源。
|