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牲畜兽医学报 2008
鸭ifn-α成熟肽基因的原核表达、复性及其抗病毒活性研究, PP. 1753-1758 Keywords: 鸭ifn-α,成熟肽基因,原核表达,色谱复性,抗病毒活性 Abstract: ?为获得鸭α-干扰素(duifn-α)并研究其生物学功能,将duifn-α成熟蛋白基因与原核表达载体pet32a+连接后转化到bl21(de3)获得工程菌bl2l(de3)/pet32a+-duifn-α,对其表达产物的纯化和复性关键技术及其抗水疱性口炎病毒(vsv)、鸭瘟强毒(dpv)活性进行研究。结果表明:bl2l(de3)/pet32a+-duifn-α经0.4mmol/liptg诱导获得高效表达,表达的重组蛋白相对分子质量约37ku,以包涵体形式存在;重组蛋白经镍金属螯合介质(ni-miac)进行纯化和复性后获得理想效果,其抗vsv活性的比活力达到12800u/mg;利用定量pcr检测到15u/ml的重组duifn-α对鸭瘟强毒表现出抑制作用,为重组duifn-α的临床应用提供试验数据。
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