猪mir-135a-5p预测靶基因apc的鉴定

？本研究旨在鉴定猪mir-135a-5p靶向脂肪发育的相关基因。首先，利用生物信息学软件分析发现，结肠腺瘤性息肉病（apc）基因的3′非翻译区（3′utr）具有两个与猪mir-135a-5p结合的潜在位点。其次，构建apc基因野生型（apc3′utr）和突变型（apc3′utrm1、apc3′utrm2、apc3′utrm3）3′utr双荧光素酶载体，并分别将其与mir-135a-5pmimics、阴性对照（nc）共转染pk-15细胞后检测荧光活性。结果显示：mir-135a-5pmimics显著降低apc3′utr和apc3′utrm2载体的荧光活性（p<0.05），而apc3′utrm1和apc3′utrm3载体的荧光活性得到完全恢复，表明mir-135a-5p主要结合在预测的第一个位点。进一步的分析表明，mir-135a-5p抑制猪前体脂肪细胞内源apc基因的mrna和蛋白质表达水平。研究结果证实，猪mir-135a-5p靶向apc基因，且调控其表达。本试验为深入研究猪mir-135a-5p的生物学功能及其调控脂肪形成的作用机制提供了基础。