体内a型精原细胞介导转mxa基因小鼠的制备

？本研究旨在探讨内源性a型精原干细胞介导法制备转抗黏液病毒基因a（myxovirusresistancegene，mxa）基因小鼠的可行性。将pcdna-mxa质粒和新型转染试剂exgen500混悬后分5点注射至7日龄的icr公鼠两侧睾丸组织内，睾丸内基因注射（testisgenetransfer,tgt）鼠在性成熟后的不同阶段（6、12及24周龄）与正常母鼠交配，检测后代外源基因整合及表达情况，选取表达mxa基因的小鼠进行h5n1亚型禽流感病毒攻毒试验，观察小鼠的健康状况并观察肺及气管的组织病变情况。结果表明，tgt鼠和正常母鼠交配后能稳定产生转基因后代小鼠，2只tgt鼠在6、12及24周龄交配后代整合率分别为11.11%(2/18)、11.76%(2/17)、11.54%(3/26)及13.64%(3/22)、13.33%(2/15)、11.76%(2/17)。2只tgt鼠后代外源基因平均整合率分别为11.47%及12.91%，之间差异不显著（p＞0.05）。rtpcr检测表明，mxa基因整合小鼠中有21.43%（3/22）测到mxa的表达；所制备的mxa表达鼠h5n1亚型禽流感病毒攻毒后全身症状、肺及气管病变程度明显比正常鼠轻。试验结果表明体内精原干细胞介导的转基因方法是一种可行的、具有很大应用前景的转基因方法，制备的转mxa基因小鼠对h5n1亚型禽流感病毒具有一定的抵抗力。