金黄色葡萄球菌clfa基因表达产物在小鼠的免疫原性分析

？为分析原核表达的金黄色葡萄球菌clfa部分基因表达产物的免疫原性，作者采用pcr方法从奶牛乳房炎病例中分离的金黄色葡萄球菌中克隆出clfa基因的部分片段，测序后用dnaman软件进行抗原位点分析。构建原核表达质粒clfa-pet-28a+，转化bl21（de3）菌，经iptg诱导表达。用hisbind柱纯化表达蛋白，加弗氏佐剂混匀后免疫小鼠。小鼠分娩后乳腺内攻菌，检查乳腺组织病理变化，乳腺组织中金葡菌数量和tnf-α水平来评价原核表达蛋白的免疫保护效果。结果显示转化bl21（de3）菌，经iptg诱导可以表达clfa蛋白。原核表达蛋白抗原免疫小鼠可以显著降低乳腺组织内金葡菌数量，tnf-α水平也显著低于对照组和全菌蛋白抗原组，提示原核表达的clfa蛋白免疫小鼠可以减少乳腺内金葡菌定植的数量，减轻乳腺内感染造成炎症的严重程度。本研究表明原核表达金黄色葡萄球菌clfa蛋白有一定的免疫保护效果，为奶牛乳房炎疫苗的研究提供科学依据。