猪繁殖与呼吸综合征病毒5′非翻译区一茎环结构的功能解析

？以猪繁殖与呼吸综合征病毒（prrsv）北美株感染性克隆为平台进行反向遗传操作，利用突变pcr将5′非翻译区（5′utr）中部分一级序列进行系列突变，以改变5′utr二级结构中的一保守茎部结构，从而解析prrsv5′utr中结构与功能的关系。通过dna转染marc145细胞观察突变体克隆的感染性，并通过免疫荧光及northernblot来研究拯救后突变病毒的复制、转录特性，以及通过空斑形态学分析突变病毒的生长特性。结果表明，prrsv5′utr中保守茎部结构的二级结构与病毒的拯救无直接关系，但其一级核苷酸序列却是prrsv病毒复制所必需的，作者还找到直接调控病毒复制的核心位点。由此证实了5′utr中调控prrsv复制过程的必需序列，为进一步解析prrsv复制过程的调控元件奠定了基础。