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牲畜兽医学报 2014
牛结蛋白基因启动子的克隆及功能的初步分析, PP. 56-61 Keywords: 结蛋白基因,启动子序列,转染,双荧光素酶报告检测,肌肉特异性 Abstract: ?旨在克隆牛结蛋白基因不同长度的启动子片段,并对其进行功能分析。本研究采用pcr法扩增牛结蛋白基因不同长度的启动子缺失序列,构建pgl3-desminpro双荧光素酶表达载体,使其转染牛骨胳肌卫星细胞和胎儿成纤维细胞,进行活性检测。同时转染牛myog和α-actin基因启动子的表达载体,以比较结蛋白启动子和myog及α-actin启动子的表达活性。结果表明,牛结蛋白基因的132~2106bp启动子都能不同程度的启动双荧光素酶报告基因在牛骨胳肌卫星细胞中的表达,且都具有肌肉特异性。300bp的结蛋白基因启动子活性最高,且高于牛myog和α-actin基因启动子的活性。从而筛选出300bp的结蛋白基因启动子为活性较高且大小合适的肌肉特异性启动子,这为转基因肉牛的生产方面奠定了重要的基础。
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