牛wif1基因印记及甲基化调控印记的分子机制研究

？为了研究wif1基因在牛中的印记状态和调控印记的分子机制，本研究首先应用基于单核苷酸多态（snp）的测序方法，分析了wif1基因在牛组织中的印记状态，结果发现，wif1基因在牛中的印记表现出组织特异性，在肺中为单等位基因表达，而在心、肝、脾、肾、肌肉和脂肪6个组织中为双等位基因表达。进一步应用亚硫酸氢盐测序法分析wif1基因启动子区29个cpg位点在牛肺（单等位基因表达）和肝（双等位基因表达）组织中等位基因特异的甲基化状态，结果发现，在肺和肝中，两条亲本链间的甲基化水平无显著差异（p>0.05）。进一步分析每个cpg位点在肺和肝中亲本链间甲基化率差异，发现与双等位基因表达的肝相比，肺中存在8个亲本链间甲基化率差异显著的cpg位点，其中3个（第1、2和6）位于转录因子的结合位点上。由于单个cpg位点的甲基化变化会影响转录因子的结合，推测这3个cpg位点的甲基化可能参与调控wif1基因的组织特异性印记。