sla-ⅰα链和β链的原核表达与抗血清制备

？猪主要组织相容性复合体ⅰ类分子又称猪白细胞抗原ⅰ类分子（sla-ⅰ），参与内源性抗原在体内的递呈过程，其结构包括重链（α链）和轻链（β链）两部分。本研究首先采用rt-pcr从原代猪肺泡巨噬细胞（pam）中扩增出sla-ⅰα链胞外区基因和β链基因；继而利用原核表达系统获得包涵体形式表达的sla-ⅰα链胞外区和β链重组蛋白质；将目的重组蛋白质洗涤、复性、纯化后，经westernblot及质谱技术进行验证。以纯化的重组蛋白质免疫兔制备抗血清，经间接elisa检测其效价达1∶256000。以制备的抗血清进行westernblot和间接免疫荧光试验，结果显示，所制备的抗血清能够特异性地识别原代及传代pam表达的sla-ⅰα链及β链蛋白。研究结果不仅为sla-ⅰ类分子的功能研究提供了有用的分析试剂，也为病毒感染的免疫机制研究奠定了必要的基础。