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牲畜兽医学报 2015
h7亚型和n9亚型禽流感病毒rt-lamp可视化检测方法的建立, PP. 1176-1183 Keywords: h7亚型禽流感病毒,n9亚型禽流感病毒,反转录环介导等温扩增,可视化检测 Abstract: ?应用反转录环介导等温扩增技术(rt-lamp),建立一种h7亚型和n9亚型禽流感病毒(aiv)可视化快速检测方法。根据genbank中h7亚型和n9亚型aivha和na基因序列,在其保守区域设计筛选出h7亚型和n9亚型aiv的特异性lamp引物各一套,优化反应条件,建立能检测h7亚型和n9亚型aivrt-lamp方法,并进行特异性和敏感性检验。结果显示,该法用实时浊度仪63℃反应1h,能特异性地检测h7亚型和n9亚型aiv,而对其他15个h亚型和8个n亚型的aiv和禽类呼吸道病原体均无扩增,最低能检出10拷贝?μl-1目的基因。所建立的h7亚型和n9亚型rt-lamp方法特异性强、敏感性高,结果可视化,操作简便、快速,为h7、n9和h7n9亚型aiv的有效防控提供技术支撑,具有较好的应用前景。
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