山东五大地方鸡禽白血病病毒主要流行亚型鉴定及其分离株gp85基因的分子特征分析

？通过对山东五大地方鸡（寿光鸡、芦花鸡、百日鸡、琅琊鸡、鲁西斗鸡）不同亚型禽白血病病毒(alv)分离株鉴定及gp85基因序列分析，探究山东五大地方鸡alv的主要流行亚型及gp85基因分子特征。分别将寿光鸡、百日鸡、芦花鸡的无菌抗凝血和琅琊鸡、鲁西斗鸡的卵白接种cef培养9~10d，常规方法提取感染细胞的cdna，用针对j亚型alv（alv-j）gp85基因（924bp）的引物和a~j（含囊膜蛋白env基因，2400bp）的群引物进行pcr扩增、克隆、测序并分析其特点。本研究发现，2009—2011年间，山东五大地方鸡均存在alv-j感染，5个alv-j分离株gp85基因之间的相似性为98.4%~99.9%，与原型毒株hprs-103相似性为97.8%~98.3%；均扩出内源性alv(alv-e)片段，与不能产生传染性病毒粒子的ev-1、ev-3、ev-6毒株相似性最高，推测为鸡基因组所携带；同时还发现，琅琊鸡、芦花鸡存在a亚型alv（alv-a）的感染。研究结果表明，2009—2011年间的山东五大地方鸡已经普遍存在alv-j，两大品系中存在alv-a和alv-j共感染，同时alv-e的片段广泛存在，这一结论揭示出山东地方鸡的禽白血病净化工作更加具有挑战性。