鸡不同生精细胞中piwil1基因启动子区dna甲基化差异研究

？旨在通过检测不同类型生精细胞中piwil1基因的转录水平和启动子区甲基化状态，为深入探讨该基因在鸡精子发生过程中的转录调控机制奠定基础。通过荧光定量pcr技术检测piwil1基因在不同生精细胞的mrna表达水平，同时采用bisulfitesequencingpcr法对启动子区进行甲基化修饰、转化和克隆测序，分析甲基化状态。结果发现，鸡piwil1基因在精子中几乎不表达，在精原细胞的表达量显著高于pgcs、sscs和四倍体(p＜0.01)。鸡piwil1基因启动子区-233～+298bp存在1个cpg岛，该岛有56个cpg位点。第1~10个cpg位点（-233～-129bp区域），精子细胞、四倍体细胞、pgcs、sscs中处于未甲基化状态，而精原细胞中甲基化比例高达0.600；第39~55个cpg位点（+105～+252bp区域），不同细胞中的甲基化水平差异显著，精原细胞中仅为0.212。pgcs、sscs中dna高甲基化在一定程度上抑制了piwil1基因的表达。研究表明:在+105～+252bp非编码区域甲基化可能对piwil1基因转录调控有一定影响，但还存在其他转录调控机制。