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牲畜兽医学报 2014
伪狂犬病病毒ge基因dna疫苗在动物体内诱导的免疫应答及il-2对其作用影响的研究, PP. 1488-1496 Keywords: 伪狂犬病病毒,ge基因,dna疫苗,il-2,免疫应答 Abstract: ?为探讨伪狂犬病病毒(prv)ge蛋白dna疫苗在动物体内诱导免疫应答的能力以及猪白细胞介素-2对其免疫作用的影响,构建pcdna3.1(+)-ge1和pcdna3.1(+)-ge2-il-2重组真核表达质粒,将其转染vero细胞后,采用间接免疫荧光、rt-pcr和westernblotting技术检测ge基因和il-2基因在vero细胞中的表达;并将构建的重组质粒、空载体、灭活病毒对照及生理盐水对照分别免疫小鼠和仔猪,通过间接elisa方法和流式细胞技术监测血清中特异性抗体及t淋巴细胞亚群含量进行免疫学评价。结果表明,pcdna3.1(+)-ge1和pcdna3.1(+)-ge2-il-2重组质粒在vero细胞中获得较高水平的表达,且表达蛋白具有较好的反应原性。重组质粒可明显提高动物机体的体液免疫应答和细胞免疫应答水平,il-2对prvgedna疫苗的免疫效果存在明显的增强作用。动物攻毒试验表明,在prv强毒攻击下融合表达质粒和混合质粒免疫可以给小鼠提供80%以上的保护,可给免疫仔猪提供60%以上的保护,表明融合蛋白和混合蛋白对prv的攻击具有一定的免疫保护作用。
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