AMPK调控Ca2+内流对高糖诱导内皮细胞凋亡的作用及其机制研究

目的　观察AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)对高糖刺激内皮细胞凋亡的抑制作用，并初步探讨其机制。方法　体外培养MS-1内皮细胞株，分别用AMPK激动剂、AMPK抑制剂、钙库依赖性钙离子通道(SOCC)抑制剂2-APB和(或)高糖处理，另设对照组(未经任何方式干预)。采用TUNEL法检测细胞凋亡情况，激光共聚焦显微镜检测细胞内钙离子(Ca2+)内流，Westernblotting检测SOCC蛋白Stim1和Orai1的表达。结果　与对照组比较，高糖能够明显诱导内皮细胞凋亡，增加Stim1和Orai1蛋白表达(P<0.05)。与高糖组比较，AMPK抑制剂+高糖能够明显增强高糖诱导的内皮细胞的凋亡(P<0.05)，而AMPK激动剂+高糖能够明显抑制高糖诱导的内皮细胞凋亡，并降低Stim1和Orai1蛋白表达(P<0.05)。与对照组比较，高糖能够明显诱导内皮细胞Ca2+内流；与高糖组比较，2-APB+高糖能够明显抑制高糖诱导的内皮细胞Ca2+内流，并阻断高糖对内皮细胞凋亡的诱导作用，而AMPK激动剂能够明显抑制高糖诱导的内皮细胞Ca2+内流。结论　AMPK能够通过降低Stim1和Orai1蛋白的表达，抑制SOCC介导的Ca2+内流，进而阻断高糖刺激的内皮细胞凋亡，对内皮细胞功能起重要的保护作用。