转化生长因子-β1对大鼠心房、心室成纤维细胞胶原表达的影响

目的　观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠心房、心室成纤维细胞胶原蛋白表达的不同影响，并探讨其可能的分子机制。方法　用组织贴块法培养大鼠原代心房、心室成纤维细胞，经SABC免疫细胞化学染色方法鉴定细胞，分别进行以下实验：①应用羟脯氨酸消化法观察不同浓度TGF-β1(0、5、10ng/ml)及不同作用时间(6、12、24、48h)对心房、心室成纤维细胞羟脯氨酸含量的影响。②用筛选的TGF-β1最佳干预浓度及作用时间分别刺激心房、心室成纤维细胞，Westernblotting检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)鉴定肌成纤维细胞后，采用羟脯氨酸法比较两种细胞培养液中羟脯氨酸的表达情况，RT-PCR检测二者Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的mRNA表达，Westernblotting检测二者Smad2/3、p-Smad2/3及Smad7蛋白的表达情况。结果　TGF-β1对大鼠心房、心室成纤维细胞均具有促进胶原蛋白合成的作用，当TGF-β1刺激条件为5ng/ml、24h时作用最强。用上述条件TGF-β1刺激心房、心室成纤维细胞，与对照组相比，心房成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白，p-Smad2/3表达增加，Smad7表达降低，差异有统计学意义(P<0.05)；心房成纤维细胞TGF-β1刺激组与心室成纤维细胞TGF-β1刺激组相比，两组Smad2/3的表达差异无统计学意义，但心房成纤维细胞TGF-β1刺激组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白，p-Smad2/3的表达明显升高，Smad7的表达明显降低(P<0.05)。结论　TGF-β1能诱导心脏成纤维细胞转化为肌成纤维细胞，可引起细胞胶原代谢异常，而且心房成纤维细胞中胶原代谢异常表现较心室成纤维细胞明显，其机制可能与TGF-β1/SMAD信号通路相关。