CD25siRNA纳米粒抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥的实验研究

目的　探讨EntransterTM-CD25siRNA纳米粒对大鼠高危角膜移植术后免疫排斥反应的抑制及延长角膜植片存活时间的作用。方法　以SD大鼠为受体(n=96)，Wistar大鼠为供体(n=48)。受体右眼碱烧伤后14d行穿透性角膜移植手术。术后将大鼠随机分为阴性对照组(A组)、对照siRNA治疗组(B组)、治疗1组(C组，术后2h给予EntransterTM-CD25siRNA复合物点眼)、治疗2组(D组，术后2h和术后第7天给予EntransterTM-CD25siRNA复合物点眼)，每组24只。裂隙灯下观察大鼠角膜情况并对其排斥反应进行评分，HE染色检测角膜组织病理学变化，透射电镜观察植片超微结构改变，免疫组化和荧光定量PCR法检测角膜CD25的表达。结果　与A、B组比较，C、D两组角膜植片存活时间明显延长，差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色显示A、B组角膜植片增厚、水肿，胶原纤维排列紊乱，大量炎性细胞浸润；C、D组植片排斥程度较A、B组明显减轻。免疫组化染色显示各组角膜上皮层、基质层、内皮层均有CD25表达，且在A、B组中的表达明显多于C、D组。透射电镜观察显示C、D组角膜植片基质层成纤维细胞凋亡及坏死较A、B组减轻，超微结构改变具有明显差异。荧光定量PCR检测显示A、B两组角膜植片中CD25mRNA的表达明显高于C、D组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论　CD25siRNA纳米粒可减轻角膜移植术后的免疫排斥反应并有效延长角膜植片存活时间。