醛固酮自分泌环在高糖致人系膜细胞损伤中的作用

[摘要]　目的　研究高糖环境下人系膜细胞(HMC)中醛固酮自分泌环及活性氧(ROS)、癌胚纤连蛋白(FN)表达水平的变化，进一步探讨醛固酮自分泌环与ROS、癌胚FNmRNA表达的关系。方法　常规培养HMC，取对数生长期细胞分为5组：正糖组(5mmol/LD-葡萄糖)，渗透压对照组(5mmol/LD-葡萄糖+20mmol/LL-葡萄糖)，正糖+依普利酮组(5mmol/LD-葡萄糖+10μmol/L依普利酮)，高糖组(25mmol/LD-葡萄糖)，高糖+依普利酮组(25mmol/LD-葡萄糖+10μmol/L依普利酮)。采用RT-PCR法检测醛固酮合酶(CYP11B2)、11β-羟基类固醇脱氢酶Ⅱ(11βHSD2)、癌胚FNmRNA表达水平，Westernblotting检测CYP11B2蛋白表达水平，放射免疫法分析细胞培养液中醛固酮水平，通过激光共聚焦显微镜观察盐皮质激素受体(MR)蛋白表达及转位情况，荧光显微镜和荧光酶标仪检测细胞内ROS水平。结果　与正糖组比较，高糖组HMC细胞CYP11B2mRNA及蛋白表达上调，ROS和癌胚FNmRNA表达亦上调，培养液中醛固酮浓度升高(P<0.05)。高糖可促进MR蛋白发生核转位，定量分析显示高糖组胞质/胞核荧光强度比值较正糖组降低30%(P<0.05)。与高糖组比较，高糖+依普利酮组ROS及癌胚FNmRNA表达下调(P<0.05)。结论　高糖负荷可通过激活HMC局部醛固酮自分泌环而导致HMC损伤。