MARCH1在多器官功能障碍综合征病程中对脾脏树突细胞MHC-Ⅱ类分子泛素化作用的研究

[摘要]　目的　观察多器官功能障碍综合征(MODS)小鼠脾脏树突细胞(DCs)中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况，探讨MARCH1对MHC-Ⅱ类分子的泛素化调控作用。方法　110只C57BL/6小鼠随机分为1、3、5、7、10d组和正常对照组，前5个实验组小鼠采用腹腔注射酵母多糖法复制MODS模型(每组20只)，正常对照组(10只)不做特殊处理。使用磁珠和MiniMACS分选磁场分离出小鼠脾脏DCs，分别采用Westernblotting和RealTimePCR检测脾脏DCs中MARCH1和MHC-Ⅱ类分子的蛋白及mRNA表达情况，并观察其变化规律与病程的关系。结果　脾脏DCs中MHC-Ⅱ类分子蛋白的表达在MODS1d时即明显升高并达到峰值(P<0.05)，而后逐渐下降，至10d时达到最低(P<0.05)。MHC-Ⅱ类分子mRNA的表达在整个病程中无明显变化(P>0.05)。MARCH1蛋白表达在MODS1d时即显著降低(P<0.05)，后开始回升，至7d时达到较高水平，而在10d时又再次下降，但与正常对照组相比，均无统计学差异。MARCH1mRNA表达的变化与蛋白表达变化规律一致。结论　在MODS病程中，MHC-Ⅱ类分子和MARCH1蛋白表达变化的趋势相反，MARCH1可能通过泛素化MHC-Ⅱ类分子来调控其表达水平，进而调控DCs的成熟状态及启动免疫应答反应。