HBV（ayw）转基因小鼠HBV复制中间体的检测

目的？建立稳定、高灵敏度化学发光Southernblotting检测系统，检测HBV（ayw）转基因小鼠肝脏及其他组织的HBV？复制水平。方法？？采用地高辛标记HBV探针，利用pTHBV1047质粒检测杂交系统的灵敏度及重复性;提取第27代HBV（ayw）转？基因小鼠肝、肾、脾和肌肉组织总DNA，经HindⅢ酶切后电泳、转膜，利用高灵敏度化学发光杂交Southernblotting检测各组织中？HBV复制中间体的水平。结果？？地高辛标记的化学发光检测系统灵敏度达0.1pg，且杂交系统稳定可靠。HBV（ayw）转基因小鼠基？因组DNA中检测到整合的外源HBVDNA，但低于HepG2.2.15细胞的HBV复制水平。肝、肾、脾和肌肉组织中都有HBV复制中间？体存在，以肝组织中含量最高。结论？？第27代HBV（ayw）转基因小鼠染色体含有稳定的HBV基因整合，为复制型HBV转基因小鼠。