1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠的制备及检测

？目的？制备1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠，为乙肝的防治提供较好的动物模型。方法？？采用受精卵显微注射？法，制备1.3拷贝C基因型HBV转基因小鼠;采用PCR、ELISA、荧光定量PCR和免疫组化方法检测HBV基因在转基因小鼠体内的？整合、复制和表达情况。结果？？共注射受精卵2282枚，成活2024枚，注射成活率88.7%。共移植假孕雌鼠72只，59只怀孕，假孕雌？鼠妊娠率81.9%。共产下F？？？0？？代小鼠185只，PCR检测共有19只整合阳性，阳性率10.3%。血清荧光定量PCR结果显示，其中6只？小鼠有HBVDNA复制，拷贝数为10？？？2？？～10？？？3？？拷贝/ml;经传代产下F？？？1？？代小鼠96只，PCR检测HBVDNA阳性33只，阳性率34.4%。？血清荧光定量PCR结果显示，其中10只小鼠有HBVDNA复制，拷贝数为10？？？2？？～10？？？3？？拷贝/ml;F？？？0？？代和F？？？1？？代小鼠随机分别各取3只？进行肝脏和肾脏HBsAg免疫组化检测结果均为阳性，且肾脏表达高于肝脏。结论？？1.3拷贝C基因可以在上述制备成功的C型？HBV转基因小鼠体内复制和表达，并且可以遗传给下一代。