Twist过表达在人腹膜间皮细胞转分化中的作用

［摘要］目的？探讨twist在人腹膜间皮细胞（HPMCs）转分化中的作用。方法？？取HPMCs细胞，分别用50mmol/L右旋葡萄？糖（高糖组）和5.6mmol/L右旋葡萄糖（对照组）刺激48h，采用Westernblotting检测twist、E-钙黏素（E-cadherin）、成纤维细胞特异性？蛋白1（Fsp1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达情况。另采用质粒pcDNA3.1-twist（pcDNA3.1-twist组）和空载体pcDNA3.1（空载？体组）分别转染常规培养的HPMCs，使HPMCs过表达twist后，采用qRT-PCR、Westernblotting方法检测twist、E-cadherin、Fsp1和？α-SMAmRNA及蛋白的表达情况。再采用质粒twist小干扰RNA（阳性转染组）和空载体pcDNA3.1（空载体组）分别转染50mmol/L？？D-葡萄糖培养48h后的HPMCs细胞，另选择未转染质粒的细胞作为亲本细胞组，采用Westernblotting检测twist下调后，E-cadher-？in、Fsp1、α-SMA蛋白水平的表达情况。结果？？与对照组相比，高糖组twist、Fsp1和α-SMA蛋白表达明显增加，E-cadherin表达减弱？（P<0.05）。与空载体组相比，HPMCs过表达twist后，pcDNA3.1-twist组E-cadherinmRNA及蛋白表达减弱，Fsp1和α-SMAmRNA？及蛋白表达增强（P<0.05）。用小干扰RNA使twist沉默后，与亲本细胞组及空载体相比，E-cadherin蛋白表达增加，Fsp1和α-SMA？蛋白表达减弱（P<0.05）。结论？？Twist过表达促进了HPMCs的转分化。