CB6F1小鼠急性粒单核细胞白血病M4（AML-M4）模型的建立及鉴定

目的？建立CB6F1小鼠急性粒单核细胞白血病M4（AML-M4）模型并进行鉴定。方法？？取CB6F1小鼠，经静脉注射小？鼠粒单核细胞白血病WEHI-3细胞，观察不同数量（1×10？？？6？？、2×10？？？6？？、5×10？？？6？？、1×10？？？7？？个）细胞接种与小鼠生存时间的相关性。取接种1？×10？？？6？？个细胞的小鼠为研究对象，动态观察其发病情况并在接种后每周行血常规检测。选择接种后4周因白血病发病濒死小鼠，取外？周血行细胞涂片形态学观察、免疫表型检测及白血病细胞主要组织相容性复合体（MHC）检测，分离骨髓组织行细胞形态学、免疫化？学和染色体核型分析，同时取肝、脾、肾、肺、心脏和脑组织行病理学观察，综合上述检测指标判断白血病模型建立的有效性。经腹腔？分别注射阿糖胞苷（Ara-C）50、100mg/kg，观察小鼠发病情况及生存期，判断该模型对化疗药物的敏感性。所有实验均取正常小鼠作？对照。结果？？接种不同数量WEHI-3细胞的小鼠均在17～33d发生白血病而死亡，接种细胞数量与生存期呈负相关（r=-0.936，P？？<0.01）。接种1×10？？？6？？个细胞的小鼠生存期为25～33（28.50±1.87）d，接种后4周因白血病发病濒死的小鼠表现如下:外周血白细胞？数目显著增加，最高可达81×10？？？9？？？/L，与正常小鼠比较差异显著（P<0.05）。外周血涂片可见胞体较大、形态不规则的白血病细胞。？骨髓细胞涂片可见大量原始和幼稚细胞，过氧化酶（POX）、特异性酯酶（SE）、非特异性酯酶（NSE）及氟化钠（NaF）抑制实验均阳性，符？合AML-M4的特征;各器官病理切片中均可见大量白血病细胞弥漫性浸润;骨髓细胞内染色体为超二倍体;外周血CD4？？？+？？？/CD8？？？+？？比值？下降，表达C-KIT和MAC-3的细胞均较正常小鼠增多（P<0.05）;MHC表型为H2Kb？？？-？？？H2Kd？？？+？？的细胞比例升高，濒死时表型以？H2Kb？？？-？？？H2Kd？？？+？？为主。Ara-C可延长该白血病模型型小鼠的生存期，且100mg/kg剂量效优低于50mg/kg（P<0.05）。结论？？静脉接？种WEHI-3白血病细胞可在CB6F1小鼠中成功构建AML-M4白血病模型。