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解放军医学杂志 2010
赭曲霉毒素A单克隆抗体的制备及直接竞争酶联免疫吸附法的建立, PP. 1440-1442 Keywords: 赭曲霉毒素A,抗体,单克隆,酶联免疫吸附测定 Abstract: [摘要]目的?建立快速且灵敏的赭曲霉毒素A(OTA)直接竞争酶联免疫吸附检测(cdELISA)方法。方法??采用OTA与卵清?蛋白(OVA)偶联作为抗原免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合、克隆筛选,获得鼠抗OTA的杂?交瘤细胞株;以ELISA方法测定抗体效价并鉴定抗体的IgG及亚类;用辣根过氧化物酶(HRP)标记OTA,建立cdELISA方法。结果????获得了3株稳定分泌高效价抗OTA单克隆抗体的杂交瘤细胞株(S-17-8、S-212-7和S-225-11),3株重链均为IgG1亚型,轻链为κ?亚型;建立了cdELISA检测方法,检测下限为0.5ng/ml。结论??以抗OTA单克隆抗体和OTA-HRP为基础,建立了灵敏且省时的检?测OTA的cdELISA方法,为进一步OTA快速筛查提供了条件。
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