布鲁杆菌Cu-ZnSOD和GroEL的克隆表达及细胞免疫特性比较分析

［摘要］？目的？分析比较布鲁杆菌两种外膜蛋白Cu-ZnSOD和GroEL的细胞免疫特性。方法？以布鲁杆菌16M基因组为模板，PCR扩增Cu-ZnSOD和GroEL蛋白的基因序列。采用Gateway方法构建表达载体，在大肠埃希菌中诱导表达并纯化，用获得的纯化蛋白刺激减毒活疫苗S19免疫小鼠的脾细胞，并测定细胞上清中IFN-γ的水平。结果？成功克隆表达了Cu-ZnSOD和GroEL蛋白，用这两种蛋白刺激S19免疫小鼠脾细胞后，细胞上清中的IFN-γ水平明显升高，并且GroEL刺激后的IFN-γ水平高于Cu-ZnSOD刺激后的IFN-γ水平。结论？GroEL和Cu-ZnSOD蛋白均具有细胞免疫反应特性，且GroEL的细胞免疫反应特性强于Cu-ZnSOD。