LBP对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用

［摘要］目的？采用脂多糖结合蛋白（LBP）和脂多糖（LPS）以不同比例、不同方式刺激THP-1细胞分泌细胞因子，探讨LBP在？LPS转运和活化过程中的调节作用，以及单核巨噬细胞受LPS活化后其炎性和负炎性因子分泌的平衡情况。方法？？将THP-1细胞？进行增殖和传代后，经PMA刺激，转化为巨噬细胞。实验分为4个组:LPS组（用不同浓度LPS单独刺激）、LBP组（用不同浓度LBP？单独刺激）、LBP/LPS预孵育组（LBP和LPS以不同浓度比例混合，37℃孵育15min）、LBP/LPS不孵育组（先加一定浓度LPS，再以不？同浓度比例加入LBP）。分别培养4、12、24h后，吸出上清液，发光法检测TNF-α，IL-10和IL-6水平，并进行统计学分析。结果？？？？THP-1细胞为悬浮生长，用PMA诱导转化后变为巨噬细胞，变为贴壁生长。分别用1、10、100、1000ng/mlLPS单独刺激巨噬细胞分？泌TNF-α，1ng/ml和其他组间均有统计学差异（P<0.05），其余3组间无统计学差异（P>0.05）。用LBP刺激巨噬细胞，LBP浓度为？1000ng/ml时，TNF-α和IL-6分泌达到最高。LBP/LPS不孵育组中，TNF-α和IL-6分泌曲线在LBP/LPS为10出现最高峰。LBP/？LPS预孵育组的TNF-α和IL-6分泌曲线较平缓，无明显分泌高峰。LPS浓度为1000ng/ml时IL-10为8±0pg/ml，其余组IL-10均小？于5pg/ml。经析因分析，LPS和LBP之间有交互关系（F=3.425，P<0.01），两者是否预孵育和培养时间有交互作用（F=4.240，P=？0.026），LBP浓度和是否预孵育之间有交互作用（F=4.896，P<0.01）。LPS浓度和是否预孵育，LPS浓度和培养时间，LBP浓度和培？养时间均无明显交互作用（P>0.05）。结论？？LPS是活化单核巨噬细胞的重要物质，LPS在高浓度时刺激巨噬细胞分泌细胞因子具？有饱和现象。LBP本身在高浓度时具有刺激巨噬细胞的活性，低浓度的LBP能增强LPS对巨噬细胞的活化，高浓度LBP则起到负？性调节作用。体外单核细胞经PMA分化成巨噬细胞后，再用LPS刺激，IL-10无明显分泌，引起炎性和负炎性因子的严重失衡。