缺氧诱导因子-1α对肺动脉平滑肌细胞端粒酶反转录酶的转录调节作用

目的？研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）对缺氧状态下大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMC）中端粒酶反转录酶（TERT）表达？的调控作用。方法？？培养大鼠PASMC，采用RT-PCR分别检测HIF-1α激动剂（CoCl？？？？？？？2？？、DFX）、HIF-1α抑制剂（FAS）、代谢抑制剂？（CBZ-LLL）、反义寡核苷酸等作用后及缺氧条件下HIF-1α、TERTmRNA的表达，Westernblotting检测HIF-1α蛋白的表达。结果？？？？缺氧4h条件下HIF-1α、TERTmRNA的表达量（分别为0.59±0.07、0.60±0.06）明显高于对照组（分别为0.11±0.02、0.10±0.01，？？？？P<0.05）。与对照组相比，加入DFX后，HIF-1α、TERTmRNA表达量（分别为0.52±0.06、0.45±0.04）明显升高（P<0.05）;加入？CoCl？？？2？？后，HIF-1α、TERTmRNA表达量（分别为0.99±0.08、0.72±0.07）也明显升高（P<0.05）。加入FAS后，HIF-1α、TERT的mR-？NA表达量（分别为0.09±0.01、0.13±0.01）较缺氧组（分别为0.65±0.06、0.52±0.04）明显降低（P<0.05）。加入CBZ-LLL后，HIF-？1αmRNA表达量（0.09±0.01）与对照组（0.06±0.01）比较无明显差异（P>0.05），但TERTmRNA表达量（0.82±0.07）较对照组？（0.08±0.01）明显升高（P<0.05）。加入CoCl？？？2？？和CBZ-LLL后，HIF-1α蛋白表达量（分别为12.0±1.1、9.0±0.8）较对照组（1.0±？0.1）明显升高（P<0.05）。缺氧条件下，加入反义寡核苷酸后TERTmRNA表达量（0.20±0.01）较缺氧组（0.75±0.06）明显降低？（？？P<0.05），但加入错配寡核苷酸的TERTmRNA表达量（0.70±0.06）与缺氧组相比无明显差异（P>0.05）;常氧条件下，同时加入反？义寡核苷酸、CoCl？？？2？？后PASMC的TERTmRNA表达量（0.45±0.04）较CoCl？？？2？？组（0.95±0.08）明显降低（P<0.05）。结论？？HIF-1α对？缺氧状态下大鼠PASMC中TERT的表达具有调控作用。