96例急性乙型肝炎患者HBV多聚酶区的耐药变异分析

目的？检测未接受过核苷（酸）类似物（NA）治疗的急性乙型肝炎患者感染的HBV是否存在耐药变异。方法？？收集96？例急性乙型肝炎患者住院早期血清，提取HBVDNA，采用巢式PCR方法扩增HBV反转录酶（RT）全基因，对PCR产物进行DNA双？向测序，对RT/S基因序列进行分子进化树分析反基因分型，对rt80、rt173、rt180、rt181、rt184、rt202、rt204、rt236和rt250等位点上的耐？药相关变异进行分析，并用克隆测序法进行验证，每个样本测定10～20个克隆。结果？？用直接测序法检出NA耐药变异8例？（8.3%），C型6例，B型2例。其中6例为拉米夫定（LAM）耐药变异，包括4例rtM204I、1例rtL80I+rtM204I和1例rtL180M+？rtM204I;另2例检出与阿德福韦酯（ADV）耐药相关的rtA181V变异。变异株多数与野生型病毒株共存。克隆测序法的结果与直接？测序法的结果大体相符，部分样本中有2种或多种耐药变异株共存，其中1例患者的样本中除LAM变异株外，还检出了ADV和恩？替卡韦（ETV）耐药变异株，变异形式分别为rtA181T+rtN236T和rtL180M+rtS202G+rtM204V。结论？？未接受过NA治疗的急性？乙型肝炎患者可以感染NA耐药株病毒，NA耐药病毒可以在人群中传播引起急性乙型肝炎，变异病毒的传播致病不只局限于LAM？耐药株。