乙型肝炎病毒多聚酶区rt229突变的流行特点及其对病毒复制力的影响

？目的？评价乙型肝炎病毒（HBV）多聚酶反转录酶（RT）功能域rt229突变对HBV复制力的影响。方法？？从慢性HBV？感染患者血清中提取HBVDNA，使用PCR扩增RT区及前C区基因，采用直接测序法分析耐药相关位点的突变;克隆患者HBV全？长基因组，获得S445-3及S869-4克隆并作为定点突变母本，以产生rt229突变的各种模式。使用无载体介导的方法将含有rt229突变？的全长HBV基因组转染入HepG2细胞系中，转染3d后采用Real-TimePCR法定量检测HBV复制中间体水平。结果？？在受检的6000例患者中，394例（6.57%）存在rt229突变，与拉米夫定（LAM）治疗相关的占78.93%，明显高于其他患者［包括接受阿德福韦酯？（ADV）治疗、初治和用药不详者］所占的21.07%。其中rtL229V、rtL229W和rtL229M单独突变分别占全部rt229突变的12.44%、？1.78%和4.57%，未发现rtL229F单独突变;rtL229V、rtL229W、rtL229M、rtL229F与LAM耐药突变共存分别占43.65%、9.14%、？9.64%和14.97%;rtL229V、rtL229M与ADV耐药突变共存分别占2.54%和1.27%。复制力评价结果显示，相对于前C区G1896A？单独突变株（S869-4），rtL229V、rtL229W、rtL229M和rtL229F突变将HBV复制力降低至2.92%、8.79%、26.04%和4.80%;相对于？LAM耐药株（S445-3），伴随有rtL229V、rtL229W、rtL229M和rtL229F的LAM耐药株的复制力增加了1.18、2.29、2.49和2.51倍。结？论？？rt229位点的突变可降低HBV的复制力，增强LAM耐药株的复制力;rt229突变可能为LAM耐药突变的补偿突变。