分化抑制因子1对创伤组织新生血管化的促进作用观察

目的？探讨分化抑制因子1（Id1）对创伤组织新生血管化的促进作用及其机制。方法？？经基因鉴定的SD大鼠16只，随？机分为非创伤组（即正常对照组，n=4）和创伤组（包括Id1基因敲除组、Id1诱导表达组和Id1正常表达组，n=4）。采用MTT法测定？Id1对血管内皮细胞Eahy926增殖的影响，实时定量RT-PCR、蛋白免疫印迹技术检测创伤1、24、48、72h后创伤组织中新生血管化标？志物血管内皮细胞生长因子（VEGF）、CD105、内皮素-1（ET-1）等的mRNA和蛋白表达变化，并用报告基因技术检测Id1对VEGF、？CD105、ET-1基因表达的调控作用。结果？？血管内皮细胞模型实验显示转染Id1siRNA后，血管内皮细胞Eahy926增殖明显受到抑？制，以72h时最显著（P<0.01）;而转染pcDNAId1后，细胞增殖于48h时即增强（P<0.05），以72h时最显著（P<0.01）。创伤组Id1？基因敲除大鼠VEGF、CD105的mRNA及蛋白表达均受到抑制（P<0.05），且伤后各时间点表达水平无明显变化。Id1诱导表达组？24h后大鼠Id1、VEGF、CD105表达均明显增强（P<0.05），于72h达高峰（P<0.01），而ET-1mRNA水平在伤后24h升高，48h达高峰？（P<0.05），72h下降。报告基因检测结果显示，Id1敲除后VEGF、CD105荧光素酶活性明显受到抑制（P<0.05），而Id1基因诱导表？达后VEGF、CD105活性明显增强（P<0.01），但Id1对ET-1的表达无明显影响。结论？？Id1能有效促进血管内皮细胞Eahy926增殖，？调节血管内皮细胞、创伤组织中VEGF、CD105以及ET-1的表达，在组织细胞新生血管化中起重要作用。