噬菌体展示技术筛选甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位的研究

目的？筛选特异性甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位。方法？？应用噬菌体表面展示技术，以2009年甲型H1N1流感？康复患者的血清作为固相筛选分子，对人工合成的噬菌体随机环七肽库进行3轮“吸附-洗脱-扩增”筛选。从顶部琼脂噬菌斑中随机？挑取32个克隆至处于对数生长期的大肠埃希菌中培养，采用ELISA，交叉反应以及竞争抑制性实验筛选并鉴定阳性克隆，对阳性克？隆进行DNA序列分析，对其编码的展示于噬菌体表面的氨基酸序列与流感病毒血凝素（HA）基因进行同源性比较，确定甲型H1N1？流感病毒抗原的模拟表位。结果？？从随机挑选的32个克隆中得到12个阳性克隆，确定氨基酸序列PLHARLP为甲型H1N1流感病？毒抗原的模拟表位，其表位由HA的第52，53，59，60，61，83，271位氨基酸共同构成。结论？？用噬菌体环七肽库筛选得到甲型H1N1？流感病毒的模拟表位，为开展用流感病毒模拟表位探索新的流感防治方法奠定了基础。