HLA-G+调节性T细胞在肾移植受者外周血中的比例及其功能研究

【摘要】目的？确定人类白细胞抗原-G（HLA-G）区别于CD4？？？？？？？+？？CD25？？？+？？FoxP3？？？+？？调节性T细胞的细胞表型特征，观察HLA-G？？？+？？T？细胞在混合淋巴细胞培养中的免疫调节作用及其在移植免疫调节中的活性和意义。方法？？采用流式细胞术检测肾移植受者外周血？CD4？？？+？？HLA-G？？？+？？、CD8？？？+？？HLA-G？？？+？？？T淋巴细胞的含量，分选HLA-G？？？+？？T淋巴细胞，分析细胞表型，采用RT-PCR检测调节性T细胞的特？异性标志FoxP3在HLA-G？？？+？？？T淋巴细胞的表达情况，以淋巴细胞分离液分离的PBMC、CD4？？？+？？CD25？？？high？？、CD4？？？+？？CD25？？？-？？细胞作为对照。？取5对活体肾移植供受者的淋巴细胞进行混合培养，分别加入流式细胞术分选纯化后的HLA-G？？？+？？、HLA-G？？？-？？T淋巴细胞，对照组只加？入供、受者淋巴细胞，MTT法观察细胞增殖和抑制情况。结果？？肾移植受者外周血CD4？？？？？？？+？？HLA-G？？？+？？、CD8？？？+？？HLA-G？？？+？？？T淋巴细胞表达？率分别为1.95%±0.34%、3.13%±0.56%。流式细胞术分选HLA-G？？？+？？？T淋巴细胞后纯度可达55.0%～75.1%。RT-PCR结果证明？上述细胞CD25、FoxP3均为阴性表达。与HLA-G？？？-？？组、对照组比较，混合淋巴培养3d后HLA-G？？？+？？组细胞增殖率明显受到抑制（P<？0.05）。结论？？在肾移植受者外周血中存在CD4？？？？？？？+？？HLA-G？？？+？？、CD8？？？+？？HLA-G？？？+？？T淋巴细胞，这类细胞不同于CD4？？？+？？CD25？？？+？？FoxP3？？？+？？调节性？T细胞，它们不表达CD25和FoxP3而表达免疫耐受分子HLA-G，在混合淋巴培养体系中，能显著抑制反应性细胞增殖，具有免疫调？节功能。