人前列腺癌细胞株PC-3中类肿瘤干细胞的培养分离和初步鉴定

【摘要】目的？从人前列腺癌细胞系PC-3中分离前列腺癌类干细胞并进行初步鉴定，为前列腺癌干细胞的进一步研究奠定基？础。方法？？分别用含血清及无血清培养基培养前列腺癌PC-3细胞，流式细胞仪检测两种不同培养条件下前列腺癌类干细胞的比例，？细胞免疫荧光鉴定前列腺癌类干细胞，MTT法测定并比较前列腺癌类干细胞与前列腺癌PC-3细胞的增殖能力及倍增时间，观察前？列腺癌类干细胞诱导分化过程及其分化后细胞的双重免疫荧光表达。结果？？少量PC-3细胞能在添加了人表皮生长因子（EGF）、人？碱性成纤维生长因子（bFGF）和人白血病抑制因子（LIF）的无血清培养基中存活并形成悬浮细胞球团，无血清培养基中前列腺癌类干？细胞比例（1.43%）显著高于含血清培养基（0.41%，P<0.05）。前列腺癌类干细胞的增殖能力（培养7d的细胞数为9.6×10？？？5？？个）强于？前列腺癌细胞（培养7d的细胞数为3×10？？？5？？个，P<0.0005），倍增时间（21.90h）短于前列腺癌细胞（28.38h，P<0.0005），免疫荧光显？示前列腺癌类干细胞表达CD133;前列腺癌类干细胞球可在含血清培养基中贴壁分化，且双重荧光检测显示其同时低表达CD44和？CD133。结论？？体外培养的前列腺癌细胞系PC-3中含有少量能表达前列腺癌干细胞表面标志物的前列腺癌类干细胞，并可通过无？血清培养基富集这类类肿瘤干细胞。