Wortmannin抑制PI3K信号通路对人甲状腺滤泡癌细胞迁移侵袭能力的影响

【摘要】目的？利用特异性PI3K抑制剂wortmannin抑制PI3K信号通路，研究其对人甲状腺滤泡癌细胞CGTHW-1迁移和侵？袭能力的影响，并初步探索其作用机制。方法？？培养CGTHW-1细胞，用MTT法筛选wortmannin最佳作用浓度及时间。将细胞分？为实验组和对照组（分别在血清饥饿和含血清两种条件下培养）。对照组细胞未给予任何处理，实验组细胞用wortmannin进行处理。？通过划痕实验、Transwell小室侵袭实验分别观察wortmannin对细胞迁移及侵袭能力的影响。利用FITC标记的鬼笔环肽进行微丝？免疫荧光染色，观察在wortmannin作用下细胞的形态学变化。免疫细胞化学SP法及半定量RT-PCR法检测wortmannin对细胞？Rac1蛋白、mRNA表达的影响。结果？？在含血清培养液培养条件下，经wortmannin处理后，划痕伤口愈合速度减慢，CGTHW-1细胞？侵袭至小室下层细胞数（13.8±3.03个）明显低于对照组（41.6±6.95个，P<0.01）;wortmannin显著降低Rac1蛋白及mRNA的表达？（P<0.05）。而在血清饥饿条件下，两组细胞迁移均受抑制，侵袭细胞数组间差异无统计学意义（P>0.05）。结论？？wortmannin能有？效抑制人甲状腺癌细胞迁移侵袭，其作用机制可能是通过抑制PI3K下游分子Rac1，从而引起细胞骨架重构。PI3K及Rac1可能成为？抑制甲状腺癌转移的关键性分子。