BNIP3表达对结肠癌细胞化疗敏感性的影响

目的？研究启动子甲基化对人结肠癌SW480细胞BNIP3基因的转录调控作用，以及通过去甲基化作用恢复BNIP3表？达对细胞化疗敏感性的影响。方法？？用DNA甲基转移酶抑制剂5-氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-dC）处理SW480细胞72h，应用甲基化特异？性PCR（MSP）检测BNIP3基因启动子区CpG岛甲基化状态。用RT-PCR和Westernblotting检测BNIP3的mRNA和蛋白表达，流？式细胞术分析细胞凋亡，MTT法观察化疗药物氟尿嘧啶（5-FU）和奥沙利铂（L-OHP）对细胞的增殖抑制作用。结果？？BNIP3基因在？SW480细胞中表达沉默，基因启动子区存在异常甲基化。1.0μmol/L的5-aza-dC可以使BNIP3基因启动子明显去甲基化、BNIP3表？达和细胞凋亡增加，并可以与5-FU和L-OHP发挥协同作用，使药物对细胞的增殖抑制作用显著增强。5-aza-dC的上述作用在低氧？培养条件下更加显著。结论？？启动子甲基化是导致结肠癌SW480细胞BNIP3基因表达沉默的重要原因。5-aza-dC可通过去甲基化？作用恢复BNIP3基因的表达，增加细胞对5-FU和L-OHP的敏感性，且其作用在低氧条件下更加显著。