载鲑鱼降钙素新型重组酿酒酵母的降血钙活性研究

目的？研究表达鲑鱼降钙素（sCT）基因的表面展示型酿酒酵母经口服给药后对Wistar大鼠血清钙含量的影响。方法？？？？鲑鱼降钙素基因克隆到表面展示型载体pYD1，LiAC法转化酿酒酵母EBY100菌株后获得转化子yAGA2-sCT。在荧光显微镜下？检测FITC标记的转基因酵母重组鲑鱼降钙素的表达情况。载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母经冷冻干燥处理后分别以0.1、0.5g/kg和？5g/kg浓度灌喂Wistar大鼠，分别列入低、中、高剂量实验组（n=6）;另设阳性药物组（皮下注射200mU/kg的密钙息，n=6））和2个条？件对照组（分别灌喂5g/kg冷冻干燥的yAGA2-V5菌株和30μg/kg的密钙息，n=6）。眼球丛静脉毛细采血管取血后测定血钙值。结？果？？荧光显微镜下观察到重组酿酒酵母yAGA2-sCT成功表达了sCT蛋白。载鲑鱼降钙素重组酿酒酵母对大鼠的降血钙活性呈现？剂量效应，实验组3个不同剂量的亚组中，高剂量组5g/kg载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT的降血钙活性最为显著（P<0.01），且在第？2h时降血钙效应达到最大。口服5g/kg的yAGA2-sCT的高剂量组在2h之后，大鼠血钙值从2.685±0.023mmol/L降低到2.355±？0.012mmol/L。结论？？5g/kg的载鲑鱼降钙素酵母yAGA2-sCT能明显降低血钙值，是实现鲑鱼降钙素口服的一种可能的新途径。