FAT10双甘酸突变体对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨FAT10的碳末端双甘酸缺失突变体对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法　收集宫颈原位癌组织标本和正常宫颈组织标本各5例，Westernblotting法检测组织中FAT10蛋白的表达。采用定点突变技术构建pcDNA3.0-flag-FAT10?GG质粒，分别将野生型FAT10、FAT10?GG及空载体(阴性对照)瞬时转染至HeLa细胞中，以野生型Hela细胞作为空白对照组，采用Westernblotting法检测转染效率，CCK-8法检测细胞增殖情况。转染24h后，各组细胞经顺铂诱导凋亡，采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果　FAT10蛋白在宫颈癌组织中的表达明显高于正常组织。过表达野生型FAT10对宫颈癌细胞的增殖有明显促进作用，但FAT10发生双甘酸突变之后，该作用受到明显抑制。流式细胞仪检测结果显示：与空白对照组(22.7%±4.2%)和阴性对照组(24.1%±3.8%)相比，过表达野生型FAT10组的细胞凋亡率(10.9%±2.0%)明显降低(P<0.05)，而FAT10?GG组的细胞凋亡率(25.7%±5.1%)无明显变化(P>0.05)。结论　FAT10可通过其碳末端双甘酸结构促进肿瘤细胞增殖，减少凋亡，从而促进肿瘤的发生发展。