骨髓动员与骨髓间充质干细胞移植促进极量肝切除大鼠肝再生作用的对照研究

目的　观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植与骨髓动员干细胞对极量肝切除大鼠肝功能恢复及肝再生的促进作用，探讨其在极量肝切除术后辅助治疗中的应用价值。方法　建立极量肝切除(约85%)大鼠模型，随机分为4组。肝切除组(对照组，n=15)：仅行极量肝切除；粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组(n=15)：腹腔注射rhG-CSF150μg/(kg?d)，连续5d；BMSCs组(n=15)：大鼠尾静脉注射1.5mlBMSCs悬液(含1.5×106个BMSCs)；G-CSF+BMSCs组(n=14)：大鼠尾静脉注射1.5mlBMSCs悬液(含1.5×106个BMSCs)，同时给予rhG-CSF150μg/(kg?d)腹腔注射，连续5d。采用流式细胞仪检测G-CSF动员后大鼠外周血CD34+细胞比例；分别于术后第3、9天采血检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和白蛋白(ALB)等肝功能指标；最后一次采血后处死大鼠取肝组织，常规HE染色观察肝组织病理变化，采用免疫组织化学方法观察肝内Ki-67及BrdU阳性细胞表达情况。结果　经流式细胞仪鉴定所分离细胞为BMSCs。rhG-CSF骨髓动员后外周血BMSCs明显升高，5d后达高峰。对照组CD34+细胞比例为0.004%，G-CSF组骨髓动员3、5、9d后CD34+细胞比例分别为0.009%、0.016%、0.019%。3个治疗组术后第9天ALB均升高，与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。3个治疗组Ki-67阳性细胞数(分别为110±28、104±34、99±22/400倍视野)及BrdU阳性细胞数(分别为18±6、16±6、17±5/400倍视野)均高于对照组(分别为73±27、12±4/400倍视野)，差异有统计学意义(P＜0.01)。结论　G-CSF动员自体BMSCs及同种异体大鼠BMSCs移植均有促进极量肝切除大鼠肝再生和肝功能恢复的作用，但二者联合应用未显示出协同作用。