乳腺癌细胞雌激素受体非配体依赖性激活对来曲唑耐药的机制研究

目的　研究雌激素受体(ER)转录调节变化在乳腺癌细胞对来曲唑耐药中的作用及其机制。方法　以来曲唑耐药细胞(MCF-7-LR-1、MCF-7-LR-2)和对照细胞(MCF-7-Aro、MCF-7-T)为研究对象。通过Westernblotting检测ER和磷酸化ER[pER(Ser118)]在两组细胞中的表达水平。通过染色质免疫共沉淀(ChIP)方法检测雌二醇(E2)处理前后细胞中ER与X盒结合蛋白1(XBP-1)增强子和三叶因子1(TFF-1)启动子区的结合情况。通过Real-timeqRT-PCR比较XBP-1和TFF-1mRNA的表达，以及雌激素反应性基因CA2、GJA1、PGR、CTSDmRNA的表达。结果　与对照细胞相比，来曲唑耐药细胞中pER(Ser118)水平显著增加，但ER表达水平并无明显变化。ChIP结果表明，与对照细胞相比，MCF-7-LR-2细胞中ER在非配体激活条件下(未加E2处理)及配体激活条件下(10nmol/LE2处理45min)与XBP-1增强子区及TFF-1启动子区的结合均显著增加。qRT-PCR结果表明，与未经E2处理的MCF-7-Aro细胞相比，耐药细胞中XBP-1和TFF-1表达均显著增加；与MCF-7-T细胞相比，耐药细胞中CA2和GJA1表达增高，PGR和CTSD的表达降低。结论　在来曲唑耐药的乳腺癌细胞中，ER以配体非依赖方式激活，pER(Ser118)水平增加，从而促进相关靶基因的转录，该机制在乳腺癌细胞对来曲唑耐药的过程中发挥重要作用。