姜黄素对小鼠肾脏再灌注损伤的保护作用及其机制研究

[摘要]　目的　探讨姜黄素对小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其可能机制。方法　选择健康雄性C57BL/6小鼠20只，随机均分为4组。假手术(SO)组小鼠仅接受腹中线开腹、游离双侧肾蒂及关腹操作；对照组小鼠制成肾脏IR模型，并于肾脏缺血同时经尾静脉注射生理盐水；姜黄素低剂量(CM-L)及高剂量(CM-H)组小鼠建立肾脏IR模型，并经尾静脉分别注射5mg/kg及20mg/kg姜黄素。再灌注6h后检测各组血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平，观察肾脏组织形态学变化；Westernblotting检测肾脏组织内Toll样受体4(TLR-4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、透明质烷(HA)蛋白的表达，实时荧光定量RT-PCR检测透明质烷合成酶(HAS)1、HAS2、HAS3以及白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达；免疫组化检测肾组织内巨噬细胞浸润情况；同时采用ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平。结果　与对照组相比，CM-L及CM-H组小鼠再灌注6h血清Scr、BUN水平明显降低(Scr：对照组235.4±28.7μmol/L，CM-L组167.8±17.2μmol/L，CM-H组125.8±13.3μmol/L；BUN：对照组21.6±2.7mmol/L，CM-L组18.1±2.4mmol/L，CM-H组12.5±1.7mmol/L；P<0.05或P<0.01)，肾小管上皮细胞损伤情况明显改善(Jablonski评分：对照组2.15±0.28分，CM-L组1.72±0.21分，CM-H组1.42±0.15分，P<0.01)；肾脏组织内TLR-4、HMGB1的mRNA及蛋白水平，HA、HAS1、HAS2、HAS3以及IL-6、TNF-αmRNA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)；巨噬细胞浸润减轻(对照组32.4±4.2个/高倍视野，CM-L组24.8±3.6个/高倍视野，CM-H组18.9±3.1个/高倍视野，P<0.01)；血清IL-6、TNF-α含量亦显著降低(IL-6：对照组1411.2±150.6pg/ml，CM-L组918.7±113.4pg/ml，CM-H组809.6±108.3pg/ml；TNF-α：对照组154.7±21.1pg/ml，CM-L组135.8±15.2pg/ml，CM-H组125.6±14.6pg/ml；P<0.05或P<0.01)。结论　姜黄素对小鼠肾脏IR损伤具有明显的保护作用，其机制可能与抑制肾脏再灌注后TLR-4信号活化有关。