c-myb表达变化在造血定型、分化及造血相关基因表达中的作用

【摘要】目的？？通过基因打靶建立c-myb+/+和c-myb+/-胚胎干细胞（ES）模型，了解转录因子c-myb在造血定型和分化中的作用。方法？？采用去除白血病抑制因子的甲基纤维素体外ES细胞诱导分化体系进行造血分化，收获c-myb+/+和c-myb+/？-（表达55%的c-myb）胚胎体进行甲基纤维素克隆形成分析。运用实时定量PCR比较分析c-myb+/+和c-myb+/-造血分化过程的造血相关基因表达。结果？？c-myb+/+和c-myb+/-ES细胞胚胎体形成相似，但c-myb+/-组胚胎体体积小于c-myb+/+？组。两组红系克隆形成单位（CFU-E）克隆形成相似，但c-myb+/-组CFU-E克隆小于c-myb+/+组。两组红系爆式克隆形成单（BFU-E）均出现于第7天，高峰在第10天。两组巨噬系克隆形成单位（CFU-M）形成相似，但c-myb+/-组CFU-M数目多于c-myb？+/+组。c-myb+/-组粒-单系克隆形成单位（CFU-GM）形成数目少于c-myb+/+组。PCR分析显示c-myb+/+和c-myb+/-组β-globin、ζ-globin、GATA3、CD34、Lys、c-fms和c-mpl基因表达没有明显差异。结论？？亚表达水平的c-myb可以满足祖细胞扩增的需要，但却影响其终末分化。亚表达水平c-myb影响前体细胞向红系和粒系的分化，但不影响巨噬细胞的分化。c-myb表达水平不影响β-globin、ζ-globin、GATA3、CD34、Lys、c-fms和c-mpl基因的表达。