ASPP1基因mRNA在肿瘤细胞株中的表达初探

【摘要】目的？？建立p53凋亡刺激蛋白基因（ASPP1）mRNA表达水平的RT-PCR测定方法;并应用该方法测定ASPP1mRNA？在正常人单核细胞与白血病细胞株Jurkat、HL-60、K562中的表达水平。方法？？应用单核细胞分离液分离正常人血液单核细胞，用？RPMI1640培养液培养细胞株Jurkat、HL-60、K562，所得细胞用Tripure分离试剂提取总RNA，用RT-PCR扩增。取ASPP1基因和？β-actin基因的扩增产物各10μl，行溴钇锭染色，在琼脂糖凝胶上进行电泳，检测ASPP1mRNA的表达水平。对ASPP1基因表达量与？β-actin表达量的比值进行比较，从而计算ASPP1在各细胞株的相对表达量。结果？？在正常人单核细胞和各白血病细胞株中均有？ASPP1基因的mRNA表达，ASPP1与β-actin的比值在正常人单核细胞中为0.545±0.019，而在白血病细胞株Jurkat、HL-60、K-562？中分别为0.155±0.081、0.199±0.016、0.191±0.015，可见ASPP1mRNA在正常细胞中的表达水平比在白血病细胞株Jurkat、？？？？HL-60、K-562中的表达水平高（P<0.01）。结论？？在肿瘤的发生、发展中，ASPP1与p53共同作用，形成ASPP-p53复合物作用于原？凋亡基因启动子，能特异性增强p53结合DNA的能力，促进p53诱导细胞凋亡的作用。ASPP1的这种功能在抑制正常细胞恶性转化？的过程中有重要作用。