不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞分离的影响

【摘要】目的？？研究不同活性的胶原酶对大鼠心肌细胞存活率的影响。方法？？用4种不同活性的胶原酶以常规酶解法分离成？年大鼠心肌细胞，观察分离即刻（D时点）、复钙60min后（E时点）和电刺激10min后（F时点）心肌细胞的存活率，采用IonOptix单细？胞动缘检测系统同步检测心肌细胞收缩幅度（ph）、ph占单个心肌细胞长度（bl）的百分比（以ph/bl表示）、心肌细胞收缩速率（+dL/？dt）和心肌细胞舒张速率（-dL/dt）等指标。结果？？观察D、E、F时点心肌细胞存活率，结果表明299U/mg胶原酶的分离效果286U/？mg、203U/mg和403U/mg的胶原酶（P<0.05）。D时点4组心肌细胞的存活率没有差别，E、F时点时存活率降低。在心肌细胞收？缩/舒张功能的检测中，299U/mg的胶原酶分离效果最佳，203、286、299U/mg和403U/mg组的ph分别是0.13±0.05、0.14±0.06、？0.14±0.06μm和0.11±0.05μm;ph/bl分别是8.8%±2.4%、8.9%±2.3%、9.2%±3.5%和7.5%±2.2%;+dL/dt分别是1.8±？0.6、1.9±0.6、2.0±0.7μm/s和1.7±0.5μm/s，-dL/dt分别是1.9±0.6、2.0±0.7、2.1±0.6μm/s和1.7±0.6μm/s。结论？？采用一？定范围（203～299U/mg）的胶原酶对心肌细胞进行分离，酶活性越大，消化时间越短，心肌细胞存活率高、收缩/舒张功能好，其中以？299U/mg活性的胶原酶效果最好。活性偏高或偏低的胶原酶分离心肌细胞的存活率和收缩/舒张功能均明显降低。