硫芥诱导大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的研究

【摘要】目的？？探讨硫芥诱导脾脏组织淋巴细胞凋亡以及caspase-3在其中的作用。方法？大鼠腹腔注射硫芥，各组动物分别于中毒后1、3、5d后麻醉，开胸取脾。HE染色法观察脾脏组织的病理改变，RT-PCR法检测大鼠脾脏组织caspase-3基因表达，Westernblot法检测caspase-3的蛋白表达。分离脾脏淋巴细胞，制备硫芥染毒细胞模型。DNA琼脂糖凝胶电泳观察caspase-3抑制剂Ac-DEVD-CHO对细胞DNA降解的影响;流式细胞仪检测Ac-DEVD-CHO对染毒细胞凋亡峰（即亚G1峰）及线粒体跨膜电位（ΔΨm）的影响。结果？硫芥中毒大鼠脾脏组织形态发生病理改变，部分淋巴细胞出现了凋亡的特征;脾脏组织caspase-3的mRNA与蛋白表达均增加:mRNA在中毒后1d的表达量与对照组比较具有统计学意义（P<0.05）;蛋白表达在中毒后3d和5d与对照组比较具有统计学意义（P<0.05，P<0.01）。caspase-3的特异性抑制剂Ac-DEVD-CHO对体外培养的硫芥染毒淋巴细胞的DNA降解和细胞G1峰左侧凋亡峰的出现有抑制作用。硫芥可导致细胞线粒体跨膜电位降低，随着中毒时间延长，线粒体膜电位的降低更明显。结论？硫芥中毒可导致大鼠脾脏组织损伤，细胞凋亡是其作用机制之一，caspase-3可能参与了这一过程并在其中发挥重要的作用。