重组免疫毒素hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞体外增殖的影响

目的？？检测基因工程免疫毒素hIL-2-LuffinP1的体外生物学活性。方法？？采用分离的C57和BALB/c小鼠脾细胞进？行混合淋巴细胞反应，刀豆球蛋白A（ConA）刺激BALB/c小鼠脾细胞进行淋巴细胞增殖实验，以LuffinP1毒素分子作为对照。？？？3？？H-？TdR核素掺入法检测hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用。以CTLL-2细胞检测hIL-2-LuffinP1对IL-2依赖细胞株的杀伤作？用，实验共设6组:PBS、IL-2、LuffinP1、LuffinP1+IL-2、hIL-2-LuffinP1、hIL-2-LuffinP1+IL-2，CTLL-2细胞加入各组试剂培养12h，台？盼蓝染色，计数每100个细胞中的死亡细胞数。结果？？随剂量增加，hIL-2-LuffinP1对淋巴细胞增殖的抑制作用逐渐增强，在10-6？mol/L浓度时，抑制率可达到97%，而LuffinP1对淋巴细胞增殖无明显抑制作用。hIL-2-LuffinP1对ConA刺激的脾细胞活化也有抑？制作用，与在混合淋巴细胞体系中一致，而LuffinP1对上述两个反应体系中的淋巴细胞增殖均无明显抑制作用。加入hIL-2-LuffinP1？+IL-2和hIL-2-LuffinP1后CTLL-2细胞的死亡率分别为29.6%和47.4%，明显高于IL-2组（5.6%，P<0.01）。结论？&