siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究

【摘要】目的？？构建人端粒酶反转录酶（hTERT）基因的RNA干扰（RNAi）表达载体，探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法？？设计针对hTERT基因的干扰靶序列，构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT，将该质粒酶切测序鉴定后，以脂质体转染MCF-7细胞，RT-PCR和Westernblot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达，MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果？？酶切电泳和测序分析表明插入序列正确，重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后，hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低，MCF-7细胞生长抑制。结论？？内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达，进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长，这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。