人脐血源基质细胞分离培养条件的优化

【摘要】目的？？探索人脐血源基质细胞（hUCBOSCs）的分离扩增条件，并观察其生物学特性。方法？？取产科胎儿脐带血，比较？不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况，瑞氏染色观？察细胞形态特征，并采用细胞化学和免疫细胞化学方法对获得的细胞进行鉴定。结果？？明胶沉淀法优于其他分离方法，首次换液时？间为第4天、改良Dexter培养体系培养效果最好。原代培养9～14d（平均12.1d）时贴壁细胞开始形成集落，15～21d（平均19.4d）时集？落数量最多，培养28d贴壁细胞铺满培养皿底，细胞类型以“成纤维样”细胞、“巨噬样”细胞、“小圆”类细胞为主。细胞化学染色显示？非特异性酯酶（NSE）染色阳性率100%，糖原染色（PAS）阳性率为100%，碱性磷酸酶（ALP）染色阳性率26%，过氧化物酶（POX）染色？阴性;免疫细胞化学染色显示CD31阳性率96%，CD68阳性率95%，Fn阳性率94%，CD45阴性。结论？？在体外可以成功培养人脐血？源基质细胞，为进一步的基础及临床研究提供了基础。？？？